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Com o avanço e utilização das técnicas de alto rendimento uma enorme quantidade de interações proteína-proteína estão disponíveis em diversos bancos de dados. Interações proteína-proteína são importantes pois permitem determinar se uma proteína é essencial para a manutenção da vida de um organismo. Identificar dentre as proteínas de um organismo quais lhe são essenciais é importante para diversas aplicações, como o desenvolvimento de fármacos. Procuramos neste trabalho, pelo método de interolog mapping, predizer a rede de interação proteína-proteína visando identificar e validar a essencialidade das proteínas hub de Corynebacterium ulcerans, sugerindo assim o seu uso como novos alvos para candidatos a drogas. O microrganismo em questão é uma das bactérias causadoras da difteria com maior potencial mutagênico, por ter como hospedeiros não só humano como também animais e por conta da difteria se manter endêmica em países como Índia e Venezuela. Identificamos 457 proteínas hub na rede de C. ulcerans e destas 421 (92,12%) tiveram essencialidade comprovada e 36 (7,88%) consideradas essenciais após análises funcionais e de enriquecimento. Com o potencial de serem utilizadas como alvo para drogas, tivemos 351 (76,8%) proteínas hub sem homologia com H. sapiens. Dentre estas 99 (21,66%) tiveram estrutura tridimensional predita, validada e com pockets drogáveis, viáveis para docking. No estudo de caso com as proteínas alvo dentre 42 derivados sintéticos de alcalóides tetrahidroisoquinolínicos foram identificados os seis mais promissores para serem usados como droga. Palavras chaves: Corynebacterium ulcerans; interolog mapping; rede de interação proteína-proteína; proteínas essenciais; docking molecular; alcalóides tetrahidroisoquinolínicos; candidatos a droga;

A febre da Chikungunya (CHIKF) é uma doença aguda seguida de artralgia grave sendo o vírus (CHIKV) transmitido por fêmeas de mosquitos dípteros do gênero Aedes. Composto de RNA de fita simples, o genoma viral codifica um total de 10 proteínas sendo 4 não estruturais e 6 estruturais. Desde que foi isolado em 1952, surtos da doença foram confirmados em diversos países gerando transtornos sociais e econômicos. Embora avanços tenham sido realizados ao longo dos anos sobre a participação da imunidade inata e adaptativa na doença, ainda são necessárias pesquisas objetivando um melhor entendimento acerca das respostas do sistema imune nas fases aguda e crônica. Assim, visando melhor compreensão acerca dos mecanismos imunológicos envolvidos com o estabelecimento da infecção pelo CHIKV, foram analisadas a frequência populacional de linfócitos T CD4, além da síntese das citocinas interleucina 10 (IL-10), Fator de transformação do crescimento β (TGF-β) e interferon-γ (IFN-γ), e a expressão das ectoenzimas CD39 e CD73 e dos receptores inibitórios proteína associada a linfócitos T citotóxicos 4 (CTLA-4) e proteína de morte celular programada 1 (PD-1) nas fases aguda e crônica da doença. Para isso, foram coletadas amostras sanguíneas de 7 pacientes acometidos com a Chikungunya na fase aguda (CHIK.A), 4 pacientes acometidos com a Chikungunya em fase crônica (CHIK.C), bem como 7 voluntários saudáveis compondo o grupo controle (CTL). Para caracterização fenotípica das células T CD4 bem como análise da produção de citocinas, enzimas e receptores, as amostras foram submetidas a lise de hemácias e, posteriormente, adquiridas em citômetro de fluxo. A análise dos dados revelou redução na frequência populacional de linfócitos T CD4 durante a fase aguda. Quanto a produção das citocinas IL-10 e IFN-γ, observou-se aumento na fase aguda, seguida de diminuição no estágio crônico. No entanto, a produção da TGFβ se mostrou inalterada em ambas as fases, resultado também observado para a expressão de CD39. Por outro lado, a ectonucleotidase CD73 se mostrou reduzida nos grupos agudo e crônico enquanto que a coexpressão CD39/CD73 apresentou redução em fase crônica. Quanto ao PD-1, não foram reveladas diferenças estatísticas significativas enquanto que a fase aguda apresentou aumento na produção do CTLA-4. No grupo crônico, por sua vez, não houve diferença estatística significativa quanto à produção deste receptor. Sugerese, portanto, que o estabelecimento da fase crônica poderia ser facilitado pelo aumento de ações imunossupressoras observadas no estágio agudo. Neste, por sua vez, a maior produção de IFN-γ assim como redução na expressão de CD73, auxiliaria em um quadro pró-inflamatório o qual contribuiria com o desenvolvimento de alguns sinais clínicos. Palavras-Chave: Citocina. CD73. CTLA-4

Este trabalho teve como objetivo verificar a atividade de quatro adoçantes comerciais sobre a formação de biofilme de Streptocccus mutans UA159 sobre a superfície de dentes artificiais compostos de resina acrílica. Inicialmente foram determinadas as concentrações inibitória e bactericida mínimas do aspartame, stevia, sucralose e xilitol em concentrações equivalentes a quatro sachês dos produtos (3,2 g/160 mL ou 0,02 g/mL). O ensaio in vitro de adesão da bactéria foi realizado em placas de microdiluição. Os dentes foram imersos em saliva artificial por 48h à 37ºC. Após, o biofilme formado foi quantificado, em triplicata, pela técnica do cristal violeta. O controle do teste utilizou sacarose 10% e lactose, principal adjuvante da composição dos adoçantes. A absorbância determinada à λ = 590 nm foi utilizada para calcular e classificar o percentual de adesão de S. mutans UA159. Não foi observada concentrações bactericidas e bacteriostáticas, entretanto a presença do adoçante promoveu a redução da adesão bacteriana quando comparada ao controle. As densidades ópticas variaram entre 0,498 e 0,681. O maior e menor percentuais de adesão foi observado, respectivamente, na presença do aspartame e do xilitol. No entanto, em todas as condições avaliadas havia células metabolicamente ativas com capacidade de adesão, sugestivo de maior potencial de desenvolvimento do biofilme e risco de infecções.

A Caatinga é um bioma exclusivamente brasileiro, situada em locais de clima semiárido e que oferece muitos recursos aproveitados pela população do Nordeste. Muitas de suas espécies são endêmicas, que apesar de serem amplamente conhecidas e usadas pela população, são pouco conhecidas em seus potenciais benefícios pela indústria e academia: uma dessas espécies é o Xique-xique. Estudos envolvendo o Xique-xique apontam elevados teores de nutrientes como minerais e fibras alimentares, sendo um potencial ingrediente para a indústria alimentícia. A caprinocultura é uma atividade muito realizada no Brasil, principalmente no semiárido, e um de seus produtos é o leite caprino, cada vez mais valorizado pelos seus benefícios. O soro do leite é gerado pela indústria a partir do processamento do leite, tornando-se um resíduo muito poluente, e apesar de ser muito nutritivo, ainda é desperdiçado. Com isso, esse trabalho apresenta uma proposta de utilizar a farinha do Xique-xique como alternativa de incorporá-la em produtos da panificação, conjuntamente ou não ao soro de leite caprino, a fim de avaliar se é possível elevar os teores nutricionais dos alimentos em que tais elementos estão presentes. Foram elaboradas quatro formulações: PC (Controle), PX (Pão adicionado de farinha de xique-xique), PS (Pão adicionado de soro de leite caprino) e PXS (Pão adicionado de farinha de xique-xique e de soro de leite caprino). Foram realizadas as análises para determinação dos teores de umidade, proteína, lipídeos, cinzas, atividade de água, acidez titulável, pH e cor instrumental. Na ausência do soro do leite caprino a farinha do xique-xique alterou o pH dos pães, o que já era esperado devido a seu pH levemente ácido. A farinha do xique-xique foi capaz de elevar os teores de minerais nas formulações testadas, bem como influenciou na retenção da umidade nas formulações em que a mesma estava presente, podendo ser uma proposta de agregação de valor à espécie, que é subutilizada e um potencial novo ingrediente para a indústria alimentícia. Palavras-chave: Cactácea. Panificação, Soro de leite caprino.

A bioprospecção de novas enzimas com características diferenciadas como a estabilidade em diferentes faixas de pH, salinidade e temperatura são muito promissoras, principalmente para aplicação em vários processos industriais. O ambiente marinho apresenta uma vasta biodiversidade ainda pouco explorada e os organismos marinhos tem sido promissórios como novas fontes de enzimas. Com isso, o objetivo do presente trabalho foi identificar e caracterizar as bactérias isoladas do tecido necrosado do zoantídeo Palythoa caribaeorum dos recifes de Carapibus – PB. Foi avaliado o padrão de crescimento de isolados sob diferentes concentrações de NaCl e a produção de proteases, celulases e lipases em diferentes condições de cultivo. Os isolados de bactérias foram submetidos a uma extração de DNA genômico, amplificação e sequenciamento do gene de RNAr 16S e análise filogenética. A determinação do padrão de crescimento foi realizado em caldo marinho Zobell 2216 nas concentrações de 2 a 20% (m/v) de NaCl por 7 dias a 37° C. Para analisar a produção de enzimas extracelulares, utilizou-se meios sólidos contendo substratos específicos: gelatina, carboximetilcelulose (CMC) e óleo vegetal residual para detecção de proteases, celulases e lipases, respectivamente. O isolado mais ativo na produção de celulases foi submetido a análise do efeito de pH (5,0; 6,0; 7,0 e 8,0), temperatura (37 e 50 ºC) e salinidade (2%, 5% e 7,5% de NaCl) na atividade enzimática. A análise filogenética revelou que os isolados pertenciam aos gêneros Bacillus, Exiguobacterium, Staphylococcus, Arthrobacter e Pseudomonas. Com relação ao crescimento de bactérias em meio com diferentes concentrações de NaCl, um isolado foi capaz de crescer até 10% de NaCl, sete isolados cresceram até 7,5% de NaCl, quatro até 5% de NaCl e um até 4% de NaCl. Constatou-se que todos os isolados produziram pelo menos uma das enzimas avaliadas, sendo que 46,1% foram produtores de proteases, 61,5% de celulases e 76,9% de lipases. Bacillus subtilis NC8 foi o único isolado capaz de produzir todas as enzimas analisadas, já Pseudomonas stutzeri NC2 foi, dentre todos, o isolado que apresentou o maior índice enzimático (celulase - 14,15). As melhores condições para produção de celulase por P. stutzeri NC2 foram pH 8,0, temperatura de 37 ºC e a concentração de NaCl de 2%. Os resultados obtidos indicam que alguns isolados de bactérias analisados apresentam potencial de exploração para produção de enzimas extracelulares, principalmente as celulases. Palavras-chave: Bactérias halotolerantes; Enzimas extracelulares; Palythoa caribaeorum.

Altera a redação da Resolução CCBiotec nº 01/2019 que estabelece as normas para o Trabalho de Conclusão de Curso (TCC) do Curso de Biotecnologia da Universidade Federal da Paraíba